抗體新分子發(fā)現(xiàn)與藥物創(chuàng)新如何突破？近日，記者專訪了百奧賽圖董事長沈月雷博士，聽聽他眼里的新藥創(chuàng)新。

沈月雷博士

記者：抗體藥物通常開發(fā)如何進(jìn)行新分子發(fā)現(xiàn)，基本流程是怎樣的？

沈月雷：目前抗體發(fā)現(xiàn)主要有動物免疫和體外展示（包括噬菌體展示和酵母展示等）兩種方式。獲得抗體以后進(jìn)行大量體外分析，比如抗體親和力分析、細(xì)胞功能實(shí)驗等，最后確定一兩個候選分子，再利用動物模型進(jìn)行藥效實(shí)驗。后面就是標(biāo)準(zhǔn)的蛋白生產(chǎn)和GLP安全評價，然后申報臨床實(shí)驗。

從目前獲批的抗體藥物統(tǒng)計來講，大部分還是通過免疫小鼠獲得的。也有一些抗體是通過體外展示技術(shù)獲得的。從方法學(xué)上來講，體外展示技術(shù)前期篩選比較快，但由于這些抗體沒有經(jīng)歷過體內(nèi)自然篩選的過程，可能會有脫靶現(xiàn)象，所以后期往往需要在組織交叉反應(yīng)和成藥性方面花不少時間。所以，整體上講動物免疫（小鼠免疫）還是主流方法。

記者：抗體藥物，尤其是PD-1和PD-L1開發(fā)的同質(zhì)化程度不低于小分子。我了解到一個現(xiàn)象，企業(yè)在立項時都講如何如何獨(dú)特有差異化，但是一到申報階段就變?yōu)橥|(zhì)化。如此慘烈同質(zhì)化競爭是因為靶點(diǎn)太少，還是新藥開發(fā)的手段過于單一導(dǎo)致的呢？

沈月雷：的確如此。當(dāng)我們立項的時候，我們經(jīng)常以為自己的立項是差異化的，這是由于我們不知道其他公司也在做。尤其是，當(dāng)一些靶點(diǎn)的信息來源是某個會議上發(fā)布的一個非常好的研究結(jié)果的時候，很多公司都會去追，所以我們選擇靶點(diǎn)往往是盲目且跟風(fēng)的。

后PD-1時代實(shí)際上靶點(diǎn)很多，我們在數(shù)據(jù)庫中找到了1500多個潛在的抗體藥物靶點(diǎn)。我們對靶點(diǎn)的認(rèn)識大多時候是來自于文獻(xiàn)。但是，即使是非常好的雜志可能也只有10%的文章可以重復(fù)。很多公司沒有能力去通過實(shí)驗來驗證這些文章的結(jié)論，只能是聽到哪家公司做的效果比較好，然后去模仿，實(shí)際做的時候和預(yù)期設(shè)想會有很大差距。

記者：也就說潛在成藥性靶點(diǎn)并不少，那各家公司為什么不能跳出少數(shù)幾個靶點(diǎn)開發(fā)新藥，是新靶點(diǎn)找不到好的藥效評價方法？

沈月雷： 剛才我講，到目前為止，全世界共批準(zhǔn)了大約100個抗體藥，針對的大約是50個靶點(diǎn)。通過數(shù)據(jù)庫，我們找到了1500多個潛在的抗體藥物靶點(diǎn)，其中接近400個靶點(diǎn)處于臨床階段，而國內(nèi)也在開發(fā)的靶點(diǎn)只有其中的四五十個。

也就是說，還有300多個在國外處于臨床階段的靶點(diǎn)，在國內(nèi)還沒有企業(yè)涉足。開發(fā)這些靶點(diǎn)需要創(chuàng)始人和投資人愿意承擔(dān)開發(fā)失敗的風(fēng)險。當(dāng)然，即便是國外處于臨床階段的靶點(diǎn)，我們也可以做出新藥。

記者：盡管是國外已經(jīng)有藥物進(jìn)入臨床階段的靶點(diǎn)，國內(nèi)仍有300多個還未申報臨床。因此國內(nèi)可以開發(fā)的靶點(diǎn)很多，就意味著創(chuàng)業(yè)機(jī)會很多。是不是因為我們的發(fā)現(xiàn)手段過于局限、單一，導(dǎo)致很難創(chuàng)新？

沈月雷：大部分創(chuàng)業(yè)公司開發(fā)的靶點(diǎn)，實(shí)際上創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊并沒有經(jīng)過真正的研究摸索。雖然高校的教授對某個靶點(diǎn)研究很久，但是他們不是最適合的創(chuàng)業(yè)者。國外大藥企，一般每年都會做很多靶點(diǎn)驗證，但是創(chuàng)業(yè)公司沒有足夠時間和精力去驗證靶點(diǎn)。我們需要思考如何將學(xué)術(shù)界發(fā)表的文章，轉(zhuǎn)化成真實(shí)的藥物研發(fā)項目。

盡管國外有接近400個靶點(diǎn)處于臨床階段，最后能成功幾個還很難說。驗證靶點(diǎn)需要做很多實(shí)驗和研究，才能真正確立項目，這對初創(chuàng)企業(yè)來講是非常困難的事情。

記者：我看很多初創(chuàng)企業(yè)干得很火，他們都有模型動物或體外評價的實(shí)驗方法？

沈月雷：其實(shí)我剛才說的400個靶點(diǎn)中，大概只有不到20%能找到動物模型。我們現(xiàn)有的動物模型，大家耳熟能詳?shù)囊簿褪悄[瘤免疫相關(guān)的靶點(diǎn)，其他的靶點(diǎn)是沒有動物模型的。

記者：300多個靶點(diǎn)已經(jīng)有藥物在國外處于臨床階段了，如果我們想做其他靶點(diǎn)，不做同質(zhì)化產(chǎn)品，有沒有快速驗證的方法？

沈月雷：基本上很難突破，例如我們有一種免疫檢查點(diǎn)人源化小鼠，美國一家企業(yè)得知后告訴我們，說他們這個靶點(diǎn)的抗體好多年前就做好了，但是因為沒有動物模型，所以一直不敢上臨床。

在大企業(yè)里，開發(fā)抗體，體外實(shí)驗比較成熟，但是做模型一般是不同的部門，如果是全新的靶點(diǎn)，模型從開始到做出來大概需要一年，再繁殖成純合子，然后進(jìn)行功能驗證，以檢驗人源化后基因功能是不是完整；如果更換了受體，是否需要更換配體；還需要把種群建立起來，需要陽性藥驗證該模型，整個過程最少需要兩年甚至更長時間才可以完成。

也就是說，獲得一個全新靶點(diǎn)或分子后，需要兩三年之后才知道靶點(diǎn)好還是不好，這對很多小公司、創(chuàng)業(yè)企業(yè)是不可承受的。

記者：現(xiàn)在投資人給企業(yè)從創(chuàng)立到上市的時間是3-4年，如果做一個靶點(diǎn)需要花費(fèi)3年，這個企業(yè)就該關(guān)閉了。所以做到PCC（臨床候選化合物）這個階段也就給半年的時間。抗體分子需要用動物模型去驗證藥效，因此動物模型成了抗體新藥開發(fā)的關(guān)鍵點(diǎn)。沈總是做哪些工作來使這個問題得到突破？

沈月雷：可能很多人知道我們的 “千鼠萬抗”計劃。我們通過文獻(xiàn)和數(shù)據(jù)庫檢索找到了1500個靶點(diǎn)。對于基因敲除后不會致死的靶點(diǎn)，我們先在全人抗體小鼠RenMabTM上，將這些基因（大概1200多個）分別敲除掉，然后再用靶點(diǎn)基因敲除的RenMabTM小鼠，制備針對該靶點(diǎn)的單克隆抗體。通過交叉免疫、體外篩選技術(shù)，獲得能夠同時識別鼠、狗、猴和人的多物種交叉識別抗體，再將這些抗體放到小鼠體內(nèi)進(jìn)行藥效評價，從而獲得候選抗體藥物。

把1000多個靶點(diǎn)從RenMabTM小鼠敲掉以后再做抗體，預(yù)計每個靶點(diǎn)會獲得不少于200個多物種交叉識別抗體，1000個靶點(diǎn)就會有20萬個抗體。這是我們?nèi)∶?ldquo;千鼠萬抗”的原因。截止目前已經(jīng)完成分別針對200多個靶點(diǎn)的基因敲除，預(yù)計明年6月份敲完全部靶點(diǎn)。

從開始敲除到最后獲得純合子，通過體外受精的方式，大概6個月以后可以獲得不少于20只純合子小鼠。通過對這些純合子小鼠進(jìn)行免疫，在血清抗體滴度達(dá)到一定程度之后，用Beacon單細(xì)胞克隆技術(shù)獲得抗體，然后將這些抗體分別克隆在表達(dá)載體上，就可以很快獲得幾百個抗體。

然后我們更進(jìn)一步推進(jìn)到藥效，把這些抗體全放到老鼠里面，比如將所有的老鼠接上腫瘤，然后每種抗體注射5只老鼠，共200個抗體，看哪只老鼠腫瘤最小或者能夠被清除。這就是我們“千鼠萬抗”計劃的整個過程。

記者：用老鼠做完驗證之后，進(jìn)入動物的安評，中間還有沒有更好的和人的相關(guān)性，及臨床的相關(guān)性更強(qiáng)的藥效驗證方法來驗證臨床前的藥效？

沈月雷：這是很好的問題，我們現(xiàn)在在做寵物的轉(zhuǎn)換醫(yī)學(xué)，會募集大概2000條左右10歲以上患自發(fā)性腫瘤的老年狗。因為我們篩選出來的抗體不只識別人和老鼠，還會識別狗、猴等。我們計劃將在老鼠體內(nèi)有效的抗體，在狗體內(nèi)進(jìn)行驗證，如果該抗體在狗體內(nèi)有效，再進(jìn)一步開展相關(guān)臨床研究。

記者：一個新靶點(diǎn)做到PCC階段，或者完成抗體的CMC開發(fā)，到了這個階段按照你的合作方式需要多少錢？

沈月雷：這個需要跟我們的商務(wù)具體溝通。剛才我也提到了，我們做的不是普通老鼠，而是RenMabTM，這是一只全人抗體小鼠。我們在RenMabTM的基礎(chǔ)上進(jìn)行各種基因改造、敲除，成本很高，針對這部分費(fèi)用，以及使用授權(quán)，我們一般會計算在權(quán)益里。